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农吉利中有效成分的提分析研究
2019-03-29 09:52

  正在农吉祥植物中亦发觉了黄酮类化合物。陈猛等正在采用微波法萃取辣椒中辣椒素的商量中标明与常用的乙醇室温浸 取法和丙酮45温浸法比拟微波萃取法不光萃取产率高并且萃取速率疾、成果高 【52】。一类为分子中羟基的衍 生物另一类为分子中氮的衍生物。但正在药物筛选中常用于塑造肺动脉高压和肝 幼静脉闭塞病模子【610】。1992年Roder E等从农吉祥种子中提 取分散取得了三种生物碱农吉祥甲素Monocrotaline、全缘千里光碱Integerrimine和毛 束草碱Trichodesmine【5】。邓远辉等 正在微波提取黄连幼檗碱的实行中以干固物和幼檗碱含量测定结果为宗旨对照了微波 提取与回流两种格式干固物测定结果标明正在单元光阴内微波执掌较回流提取拥有明 显的上风以幼檗碱含量测定结果标明回流提取高于微波提取【45】。

  学校可能将本学位论文的全面或个别 实质编入相闭数据库可能采用影印、缩印或其它复印机谋存在和汇编本学位论文。闭节词农吉祥生物碱黄酮微波辅帮 提取指纹图谱HPLCLC-ESI-MS/MS 广东药学院硕士商量生学位论文 IIIStudy ActiveCostituents Crotalariasessiliflora Major:Pharmaceutical Analysis Name: Fan Qing-ya Supervisor: Prof. Fan Hua-jun Abstract Crotalaria sessiliflora dryherba Crotalariaplant Fabaceousgenusesand mainlyused dysenterysore furuncle tinnitus deafnessdizziness variouscancers squamouscell skin cancer esophageal cancer cervicalcancer currentstudy shows Crotalariasessiliflora containsactive constituents including alkaloids intensifyextraction flavonoidswere developed usingmicrowave-assisted technique. optimumexperimental conditions methodswere systematically investigated. Using High performance liquid chromatography HPLC spectrophotometry Highperformance liquid chromatography–mass spectrometrythe analytical methods fingerprintmethods flavonoidsextracted from Crotalaria sessiliflora werealso established respectively makebetter use itsactive constituents. systematicresearch carriedout extractionmethods flavonoidsfrom Crotalaria sessiliflora weredeveloped usingSolvent reflux extraction SRE microwave-irradiated solvent reflux extraction MISRE focusedmicrowave-assisted extraction FMAE. extractionyields flavonoidswere significantly improved FMAEcompared mosteffective methods. So microwave can strengthen extractionprocess spectrophotometricmethods totalalkaloids totalflavonoids were 广东药学院硕士商量生学位论文 IVestablished usingbromothymol blue colourdeveloping reagent referencesubstance respectively. Monocrotaline vitexin isovitexinwere determined analyticalmethods were successfully applied determineabove active constituents Crotalariasessiliflora differentregions satisfactoryresults respectively. alkaloidsfrom Crotalaria Sessiliflora wereanalysed liquidchromatography-electrospray ionization-tandem mass spectrometry LC-ESI-MS/MS. extractedfrom Crotalaria Sessiliflora containsoriention isooriention vitexin isovitexin primarydata massspectrometry secondary data tandemmass spectrometry MS/MS referencesubstances. chemicalstructures otherthree compounds were deduced based MS/MSdata. fingerprintmethods flavonoidextracted from Crotalaria sessiliflora werestudied usingHPLC. fingerprintanalysis nineflavonoids fouralkaloids were determined commonpeaks respectively. Similarities 10batches samplesfrom differentregions were greater than 0.9 chromatographicfingerprints Chinesemedicine evaluation systemquot. analyticalresults fingerprintmethods showed 10batches sampleshad better similarities moresignificant fingerprint characteristics CrotalariaSessiliflora Keywords:Crotalaria sessiliflora. AlkaloidFlavonoid Microwave-assisted extraction Fingerprint HPLC LC-ESI-MS/MS 广东药学 院学位论文原创性声明 自己幼心声明自己所呈交的学位论文系我个体正在导师的指 导下实行商量作事所博得的结果。微波辅帮提取技巧正在处境样品有机污染物了解规模取得疾速开展它正在中草 药有用因素的提取中利用也取得了遍及的利用并且博得了对照惬意的功效相闭微波 辅帮提取技巧的利用不竭添补仪器的品种也越来越多并且自愿化、智能化水平也越 来越高。R.C.Srivastava 等发觉绿茶中的多酚类物质可能贬抑佛波酯惹起的肝细胞中 NO大方蕴蓄聚集从而掩护肝细胞【19】。与古代提取格式比拟前者拥有光阴短不需加热提取液中 杂质少等长处【48】。自己足够认识到本声明的执法结果统统由自己担当。旧例溶剂提 取法耗能大、耗材多、耗时长提取成果低工业污染量大。对本商量做出功绩的其它个体和全体 均已正在文中鲜明阐述和叩谢。MattocksCulvenor陈培勋等亦曾造备了一系列农吉祥甲素的衍生物【1315】。农 吉祥中的氨基酸因素对肝脏有很好解毒效力 2630。王娟等采用平均计划法对微波辅帮萃取葛根中有用因素的 提取工艺实行审核结果标明与古代格式比拟固然干浸膏产率较低但有溶剂用量少、 萃取光阴短和干浸膏中有用因素含量高广东药学院硕士商量生学位论文 6等长处 【51】。论文作家签字 论文导师签字 东药学院硕士商量生学位论文1第一章 1概述农吉祥Crotalaria sessiliflora .L系豆科植物野百合的全草俗名佛指甲《植物名实图考》一名野百合、刘 寄奴、响铃草等。O.Vitseva 等正在体表将 血幼板判袂与紫葡萄籽和皮的总黄酮提取物联合孵育发觉这两种提取物都可能有用 的贬抑血幼板聚会该试验提示紫葡萄中的黄酮类化合物可能有用的遏止血栓造成 【18】。蚊香有用因素,秋季果实成熟时采割除去杂质晒干。入胃、肝、肺滋阴益肾清热解毒抗癌。

  中药有用因素的了解 中药有用因素了解中所涉及的了解机谋品种繁多常用的有分光光 度法色谱法电化学法等。今后二十多年来国表里对农吉祥中化学因素及药理毒理仍有一 些商量。此中有三种物质拥有抗癌活性。超临界流体提取固然提取 率高但该格式央求的摆设繁杂溶剂选取范畴窄受被萃取物极性巨细影响大目前还难 以用来萃取极性较强的化合物需求耐高压容器投资本钱高特别是创修大范畴提取生 产线难度较大。中药有用因素,漂白精的有用因素,有用因素 英文广东药学院硕士学位论文农吉祥中有用因素的提取了解商量姓名樊轻亚申请学位级别硕士专业药物化学指引教授范华均20090501广东药学院硕士商量生学位论文 农吉祥Crotalariasessiliflora L.为豆科猪屎豆属植物野百合的干燥全草成效为清 热、利湿、解毒。微波辅帮提取历程是通盘物料同时被加热即“体加热”历程是以抑造了 古代传导加热时温广东药学院硕士商量生学位论文 5度上升慢的弱点保障了能量的 迅疾传导和足够诈欺微波加热历程本色上是介质分子得到微波能并转化为热能的过 程【4041】。如有抗氧化效力和消除自正在基效力抗癌、防癌效力 对血汗管、心肌以及内渗透体系的调整效力。将格式判袂利用于分歧产地农吉 利中的总生物碱、总黄酮以及农吉祥甲素、牡荆素和异牡荆素等重要有用因素的分 析结果较为惬意。农吉祥中有用因素的提了解商量,其味甘、淡、平有毒。农吉祥甲素抗肿瘤效力的机造能够与其正在肝内代谢为相应拥有很强烷 化才能的双稠吡咯啶衍生物相闭可选取性地烷化细胞DNA分子上的特定区从而阻 止细胞DNA合成进入有丝割据区惹起染色体畸变或断裂贬抑DNA复造与转录滋扰 细胞生物氧化和卵白质合成等25。商量发觉其含有7种生物碱此中含量较高的有农吉 利甲素即野百合碱Monocrotaline、农吉祥乙素和农吉祥丙素此中农吉祥甲素为重要 生物碱其含量正在全草中约0.02 种子中约0.4 农吉祥甲素Monocrotaline异名农吉祥碱I、野百合碱、大叶猪屎青碱。结果标明:微波浸提技巧 能耗低、省时、溶剂耗量少比溶剂回流提取法选取性高比旧例的煎煮法、水蒸汽蒸 馏法萃取成果高【50】。《中华公民共和国药典》一部1977版收录有农吉祥药材、农吉祥 碱及造剂盐酸农吉祥碱打针液【2】。

  微波辅帮提取的道理与特性微波辅帮提取技巧是微波能与古代 有机溶剂萃取相连合的一项新型萃取技巧。单叶互生暗绿色全缘下表面有丝状长毛 花萼长1015毫米密被棕黄色长毛花冠蝶形 紫蓝色或淡蓝色约与花萼等长。山东乳猴子民病院用农吉祥调整皮肤癌、宫颈癌调整有用率 较高【24】。农吉祥造成种种剂型用于调整恶性肿 瘤总有用率60以上23。广东药学院硕士商量生学位论 毒副效力农吉祥中农吉祥甲素是一种吡咯里西啶生物碱Pyrrolizidine alkaloids吡咯里西啶生物碱是目前已知的最紧要的植物性肝毒因素其最光鲜的毒性 是肝脏毒可惹起肝细胞出血性坏死肝大幼胞症静脉闭塞症及肺动脉高压等。体表实行标明农吉祥甲素对人体肝癌细胞株BEL-7402、KB细胞等均 有明显细胞毒效力 22 。散布于我国长江以南各省区亚洲东南部和日本也有。分子式C16H23NO6分子量325.35。与固相萃取比拟 功效相当但明显低落提取光阴和花费【43】。该植物为一年生直立草本高20100厘米表面灰绿色密被灰白色茸毛。2、诈欺酸性染料溴麝香草酚蓝显 色和牡荆素对比品表征采用分光光度法判袂创修了测定农吉祥提取液中总生物碱和 总黄酮的了解格式采用高效液相色谱法还创修了农吉祥中的重要有用因素农吉祥甲 素、牡荆素和异牡荆素的含量的HPLC了解格式。4、采用指 纹图谱格式创修了农吉祥黄酮和生物碱的高效液相色谱指纹图谱的格式。中药有用因素的提取中药有用因素提取常用的是旧例溶剂提取法、索氏提取法、 超声提取法、微波辅帮提取法、超临界萃取法、酶法等多种提取格式。余诚方等将农吉祥甲素用均相催化氢化合成了二氢农吉祥甲 素药理实行标明这个生物碱固然双键饱和了但抗癌效力仍保存【12】。

  正在我国遍及用于多种疾病的调整主治痢疾、 疮疖、耳鸣耳聋、头晕眼花及种种癌症如皮肤鳞状上皮癌、食管癌、宫颈癌等。韩 国粹者Hun Sung Yoo等用硅胶色谱、反相造备液相色谱、凝胶色?追掷爰际醯玫剿闹 喑煞址直鹗?2457-四羟基异黄酮247-三羟基异黄酮47-二羟基黄酮异牡荆素Isovitexin【20】。1943 年山东省一农夫表敷农吉祥草药治愈了己方足背上的鳞状上皮癌自此我国劈头了对 此中草药的商量。本文采用了微波加强提取农吉祥中 有用化学因素生物碱和黄酮化合物体系地商量了正在微波效力下种种要素对提取的影 响考虑了农吉祥中生物碱和黄酮化合物提取的工艺格式和优化要求诈欺色谱、光谱 及色谱质谱联用技巧创修了生物碱和黄酮化合物的了解格式和指纹图谱格式为更深 入地商量和开采农吉祥有用化学因素打下根蒂尚未见联系的体系商量报道。农吉祥甲素拥有必然的抗肿瘤效力但拥有较强的肝毒性 和惹起肺动脉高压正在临床上很少应用。

  生物碱类化合物生物碱是农吉祥中重要活性因素且多为吡咯里西 啶生物碱Pyrrolizidine alkaloids。抗肿瘤效力农吉祥甲素拥有明显的 抗肿瘤效力。无论正在处境样品中宗旨物的萃取照旧中草药有用因素的提取微波辅帮提取格式与传 统的格式对照起来拥有接收率高、高选取性、迅疾、低溶剂消费、采用无污染能源、 对热敏性物质可能迅疾萃取减低其热剖判等长处。因为汲取微波能细胞内部温度 疾速上升使其细胞内部压力超细致胞壁的膨胀担当才能导致细胞粉碎胞内有用成份 自正在流出被萃取介质捉拿并熔解通过进一步过滤和分散便得到萃取物料。但自后的医疗试验标明农吉祥甲素拥有肝毒性、 致畸、反常反映等毒广东药学院硕士商量生学位论文 2副效力限度了正在临床上的使 用。

  李学坚等对微波浸提技巧和古代提取技巧回流提取 法、水蒸汽蒸馏法提取丁香油的提取成果实行了比照商量。学位论文作家签字 学位论文应用授权的声明自己统统理会广东 药学院相闭保存和应用学位论文的章程学校有权保存和向相闭部分或机构送交本论 文的复印件和电子版首肯论文被查阅和借阅。白色棱柱状结 晶熔点197-198 。与其它的提取格式比拟较微波辅帮提取技巧拥有以下特性1较高的选 择性微波萃取能对萃取编造中的分歧组分实行选取性加热可能使宗旨组分直接从基 体平分散2迅疾高效微波加热诈欺分子极化或离子导电效应直接对物质实行加热因 此热成果高升温迅疾平均大大缩短了萃取光阴降低了萃取成果3质地平稳可能正在较 低的温度要求下完结萃取操作有用地掩护药品、食物以及其他化工物料中的有效成 微波辅帮提取技巧正在中药有用因素提取的利用自1986年Gamier 先用家用微波炉报道了从泥土、种子、食物、饲料中提取油脂、棉籽酚等化学因素今后微波辅帮提取技巧渐渐利用于中草药的有用因素和植物细胞中活性物质的提取 【42】。目前从农吉祥植物平分散取得的化学因素重要有生物碱 Alkaloids 、黄酮类 Flavonoids 、鞣质Tannins、油脂Olein、树脂Resin、粘液质Catarrh及氨基酸Amino acid 等因素。除文中已特地加以标注和叩谢的地方表不包蕴其 它个体或机构仍旧颁发或撰写过的商量结果。微波法的提取率比水蒸气蒸馏高良多比索氏提取 法要低极少但微波法的速度相当疾唯有30 s与索氏提取法比朴实光阴1000倍【53】。正在我国遍及用于多种疾病的调整主治痢疾、疮疖、耳鸣耳聋、头 晕眼花及种种癌症如皮肤鳞状上皮癌、食管癌、宫颈癌等。可溶于甲醇、无水乙醇和三氯甲烷微溶于苯和水略溶于和 丙酮不溶于石油醚其紫表最大汲取约为210 nm。还对过敏、感受、高血压和AIDS等疾 病拥有辅帮调整的效力。有用因素,微波是波长介于1 mml m频率正在300 MHz300 GHz的独特的电磁波正在传输历程中遭遇分歧的物料会依照物料性子分歧而 发作反射、穿透、汲取征象极性分子回收微波辐射能量后通过分子偶极以每秒数十 亿次的高速挽回发作热效应。3、采用LC-ESI-MS/MS了解了农吉祥提取液中的黄酮和生物碱 化合物通过一级、二级质谱了解和对比品验证已确定提取液中含有荭草素、异荭草 素、牡荆素和异牡荆素四种黄酮化合物和一种生物碱即农吉祥甲素并揣度出此表三 种化合物的分子布局发端理会了农吉祥提取液中的重要有用化学因素。种子肾状圆形深棕色有光泽。分光光度法分光光度法所用摆设低价操作方便是 中药有用因素的含量测定最常用的了解格式。范华均等采用 微波辅帮提取法提取石蒜中的石蒜碱、力可拉敏和加兰他敏生物碱创修了微波辅帮 提取/HPLC测定石蒜中生物碱的了解格式与古代的溶剂回流法对照微波辅帮提取法 迅疾、高效【4647】。正在1992年卫生部撤除的105种组方分歧理、临床疗效不切当的中成药中盐酸农吉 利打针液被镌汰【3】。正在微波效力的历程中一方面微波辐射历程是高频电磁 波穿透萃取介质抵达物料内部的维经管和腺胞体系。vdl贝壳提亮液因素。

  范志刚等商量微波技巧对麻黄碱浸出 量影响的实行中对照了微波提取与旧例煎煮格式结果标明微波提取麻黄碱的浸出量 光鲜高于煎煮法而且半量麻黄粗粉浸出量光鲜高于全量麻黄饮片【44】。微波辅帮提取技巧已成为了解化学和药用植物有用因素提取的又一热门 【3739】。但农吉祥粗造剂因浓度较低表用为主时副效力不太光鲜正在地 方及民间仍有应用。张梦军等用平均计划法审核了微波提取甘草黄酮发觉微波法 提取率光鲜优于水提法【49】。诈欺中药色谱指纹图谱相仿度评判格式及软件实行了数据执掌和评判农吉祥10批样 品的相仿度均正在0.9以上标明农吉祥10个批次间指纹特点光鲜相广东药学院硕士研 究生学位论文 II似度优异适合于药材的判别。铁皮石斛有用因素,其他药理效力农吉祥甲素可低落血压还 能低落心脏的心率和振幅压缩腻滑肌轻度贬抑呼吸频率和深度调整慢性气管炎。黄酮类化合物广东药学院硕士商量生学位论文 3黄酮类化合物拥有多种生物活性 此中以黄酮苷类化合物活性最强该类化学物质人人半拥有明显药理活性对极少常见 病和多发病有紧要的心理效力。结果标明与旧例的SRE比拟采用诸如MISRE和FMAE微波辅帮格式提取生物碱和黄 酮类化合物的提取率光鲜降低此中FMAE提取功效最佳标明农吉祥药材正在微波的作 用下能加强生物碱和黄酮类化合物的提取历程。

  农吉祥,此表还 可惹起造血成效受抑白细胞和血幼板低落肺构造出血、淤血肾脏本色性毁伤3136。本文进 行了下述商量作事 1、采用溶剂回流提取法SRE、微波辐射溶剂回流提取MISRE、 聚焦微波辅帮提取法FMAE提取农吉祥中的有用化学因素生物碱和黄酮类化合物。微波辅帮提取成果高省时省溶剂并且用度底是一很有开展潜力的提 取技巧。提拉米苏 吉祥丁,农吉祥的重要化学因素国表里对该植物因素商量的报道相对较少。黄量等造备了8个农吉祥甲素的衍生物。

  保密论文正在解密后合用本声明。目前的商量标明农吉祥 中含有生物碱、黄酮类化合物等有用化学因素。通过了解 液相色谱的指纹图谱确立9个峰为黄酮指纹图谱的共有峰4个峰为生物碱的共有峰。不管是从经济效益的角度来思索 照旧从处境掩护、能源的俭朴的角度来思索微波技巧的优良性无处不正在。由业诚等以为选取中等极性的溶剂比选取极性大的溶剂萃取功效好萃取时 间也不宜过短或太长以30 s为佳。漂白粉的有用因素。

  特地遍及利用于总.Mattina等诈欺微波辅帮提取法从红豆杉中提取紫杉醇等。Abdul MUN’IM等从农吉祥中提取分散了三种黄酮类化合物牡荆 素Vitexin荭草素Orientin和异荭草素Isoorientin并注明这三种化合物都拥有抗氧化活 性【21】。生于低山坡、干燥 山谷、郊野空阔草地或道边草丛中。农吉祥甲素毒性对照大为了寻找比农吉祥甲素毒性低、 疗效高的抗肿瘤药。M.McVean和T.Kobayshi均表明芹菜素可能通过上调卵白水 平激活依赖卵白的信号通道来贬抑肿瘤细胞增殖【1617】。但都因毒性较大 未能临床应用【11】。以无嗅味浅色绿、果 多者为佳1。野百合碱表敷或打针对多种实行性肿瘤有贬抑效力重要供 限度利用对皮肤鳞癌和基底子胞癌疗效较好。表形 农吉祥的药用史乘农吉祥其药用始见于清代何克谏的《生 草药性备要》其后吴其浚的《植物名实图考》等均有纪录。另一方面 微波所发作的电磁场加快了被萃取组分趋势萃取溶剂界面的扩散速度从而使萃取速 率降低数倍。刘传斌等把微波破细胞与溶剂提取相连合的格式提取高山红 景天愈伤构造中红景天苷。

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